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　　摘要：在《Human Gene Therapy》發(fā)表的一篇文章中，實驗者用GDS-80低壓基因槍在30psi的可耐受壓力下進行三次轟擊可以產(chǎn)生與在更高壓力下進行一次轟擊相當?shù)霓D(zhuǎn)染效率，這通常會導致嚴重的肝臟撕裂傷。總之，用金DNA基因槍轟擊肝臟是HBT轉(zhuǎn)染淺表肝細胞的一個潛在的有用的替代方法，特別是因為它不會引起嚴重的肝損傷。

　　雖然體內(nèi)非病毒基因的投遞對肝基因治療至關重要，但仍存在許多技術障礙。將編碼DNA的增強綠色熒光蛋白(EGFP)包覆在金顆粒(金-DNA)上，溶解于磷酸鹽緩沖鹽(純DNA)，并作為聚合物佐劑(jetPEI)-半乳糖苷酶溶液(聚合物-DNA)制備。采用非病毒方法進行小鼠肝轉(zhuǎn)染，包括基于流體動力學的純DNA轉(zhuǎn)染(HBT)、聚合物DNA的轉(zhuǎn)運和肝內(nèi)注射、純DNA、金DNA和聚合物DNA的基因槍轟擊。只有HBT和基因槍轟擊產(chǎn)生大量EGFP肝細胞。在優(yōu)化的條件下，HBT除肝邊緣外，其全肝轉(zhuǎn)染率為20%。HBT導致明顯的肝梗塞，最突出的是肝邊緣。EGFP肝細胞主要位于淺層。

　　HBT和基因槍轟擊均能有效地轉(zhuǎn)染小鼠肝細胞。重型肝梗塞阻礙HBT后肝細胞外基因表達。在30 psi的條件下，用加速粒子基因槍反復轟擊金-DNA，是HBT在體內(nèi)向淺表肝細胞傳遞基因的潛在替代品。

　　在《Human Gene Therapy》發(fā)表的一篇文章中，研究人員用增強的綠色熒光蛋白編碼 DNA 進行低壓基因槍轟擊檢查小鼠肝臟轉(zhuǎn)染的有效性，并將結果與其他化學或物理方法獲得的結果進行比較。結果表明，低壓手持式基因槍僅通過 20-45 psi 的壓力，即可將金 DNA 轟擊到小鼠肝臟中。

　　實驗中，為了確定CTGF與E7 DNA疫苗連接后是否能增強小鼠E7特異性T細胞介導的免疫應答，研究人員用流式細胞術分析了E7特異性CD4+和CD8+T細胞前體的細胞內(nèi)細胞因子染色。結果證實了接種與E7相關的編碼CTGF的DNA可顯著增強E7特異性T細胞免疫。

　　為了確定E7特異性CD8+T細胞反應的增強是否轉(zhuǎn)化為E7特異性抗腫瘤保護作用，研究人員進行了體內(nèi)腫瘤保護實驗，證實了接種CTGF/E7 DNA 增強了表達E7腫瘤細胞系的小鼠的腫瘤保護作用。

　　結果顯示，當CTGF與DNA疫苗中的E7抗原相連時，CTGF可以保護接種的小鼠免受表達E7的腫瘤細胞的致命攻擊。

　　實驗中研究人員發(fā)現(xiàn)，用GDS-80低壓基因槍在30psi的可耐受壓力下進行三次轟擊可以產(chǎn)生與在更高壓力下進行一次轟擊相當?shù)霓D(zhuǎn)染效率，這通常會導致嚴重的肝臟撕裂傷?？傊?，用金DNA基因槍轟擊肝臟是HBT轉(zhuǎn)染淺表肝細胞的一個潛在的有用的替代方法，特別是因為它不會引起嚴重的肝損傷。

　　在本研究中，實驗人員證明了將HPV16 E7抗原與CTGF DNA連接可顯著提高表達E7的DNA疫苗的效力。

　　實驗中，研究人員在接種后1天或5天取小鼠腹股溝淋巴結，用PE結合抗CD11c抗體流式細胞儀分析了CD11c+細胞百分率，接種小鼠并收集了富含CD11c+的細胞。

　　[1] Gene Gun Bombardment with DNA-Coated Gold Particles Is a Potential Alternative to Hydrodynamics-Based Transfection for Delivering Genes into Superficial Hepatocytes[J]. Human Gene Therapy, 2008, 19(4):391.